Gt(ROSA)26Sor^{em1(CAG-TagBFP,-mKate2,-EGFP)Jich}

这个靶向载体是基于Addgene的Ai9载体改造的，去除了DTA和neomycin序列。载体全长13.7kb，从5'至3'的序列包括CMV增强子/鸡β-actin驱动的CAG启动子、FRT位点、一段由loxP调控的停泊子（包含所有3个阅读框的终止密码子和三重polyA信号），Kaleidoscope构建（详情后面详述）、木瓜病毒后转录调控元件（WPRE）以及polyA信号。CRISPR/cas9基因编辑使用了gRNA（ACTCCAGTCTTTCTAGAAGA），3'端有2'-O-Methyl修饰，以及首尾的3'磷硫酯键。Kaleidoscope包含三个间隔2A自切序列的荧光细胞生物学报告器，从5'到3'，融合了鼠溶酶体相关膜蛋白1（LAMP1）基因和增强的单体蓝光荧光蛋白（TagBFP）、P2A自切肽、N端的线粒体靶向前导序列（来自人类细胞色素c氧化酶亚基8A[COX8A]），与远红光荧光蛋白（mKate2）连接，T2A自切肽，以及增强绿色荧光蛋白（TUBA1C）序列与人类 tubulin α1c的序列。信息来源为(J:345362)。