Gt(ROSA)26Sor^{em28(KRT18-ACE2)Mvw}

CRISPR/cas9基因编辑和RMCE(重组酶介导 cassette exchange)被用来在Gt(ROSA)26Sor(NSG.RosaBxb-GT/GA)基因座中插入一段人类角蛋白18启动子，该启动子驱动全长人类ACE2蛋白的表达，带有C端的FLAG标签。之前，来自NOD.Cg-Prkdc Il2rg/SzJ(NSG)的受精卵已经被定向插入了Gt(ROSA)26Sor(ROSABxb-GT/GA)等位基因，其中包含一个位于第一内含子的双Bxb1 attP位点“安全港着陆垫”。着陆垫由48bp的Bxb1 attP-GT序列和48bp的Bxb1 attP-GA序列组成，两者之间由240bp的Gt(ROSA)26Sor基因序列的天然间隔。DNA供体质粒，包含两个异源的attB位点和供体基因，随后通过Bxb1整合酶在RMCE准备好的受精卵(attP-GT/GA)中进行微注射。这个等位基因类似于Low BE等在2022年Sci Rep期刊上描述的em27等位基因(J:101977)。