SpCas9和gRNA Ace2-cRNA_32(protospacer序列为5-AAGGCTGAGAAGGAGCCAGG-3)被用来在小鼠Ace2起始密码子下游13个碱基的位置引入以下序列:信号肽编码序列,翻译后产生Ace2的WLLLSLVAVTTA氨基酸序列,与小鼠Ace2的前5个氨基酸相接,人类ACE2的cDNA序列带有SV40内含子,872bp的人类ACE2 3'UTR,100bp的人类Ace2 polyadenylation区域下游的间隔序列,一个反向排列的包含鼠U6启动子驱动的Ace2-gRNA32指导RNA,带有2xPolIII终止子的元件,所有这些都相对于Ace2、内含子切割点和SV40 polyadenylation序列。这个设计是为了捕获和剪切任何可能从hACE2 cassette剪接过去的鼠Ace2同源异构体。Flp介导的重组已移除了含FRT标记的neo cassette。(来源:J:101977)
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count