Cas9和gRNA(Tmprss2-crRNA_5,protospacer序列为5-GTGCTCAGACTGATACCCG-3)被用来在exon 3的第19位位置引入以下序列:GGSG连接子,P2A,人TMPRSS2的cDNA编码序列,包含SV40内含子以增强表达,1837bp的人类TMPRSS2 3'UTR,112bp的人类TMPPRSS2polyadenylation区域下游的间隔序列,一个由反向排列的鼠U6启动子驱动的Tmprss2-gRNA5指导RNA,带有2xPolIII终止子的元件,以及一个Flp重组酶靶点(FRT)位点,后面跟着3个框架的ATG短开放阅读框。这个元件设计用来捕获并剪切任何可能从hTMPRSS2元件剪接过去的鼠TMPPRSS2同源物。FRT位点允许在需要时通过Flp介导的靶向串联整合事件的塌陷。(来源:J:101977)
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count