Ace2^{em1(ACE2)Synbl}

增强特异性的eSpCas9和gRNA Ace2-cRNA_32（protospacer序列为5'-AAGGCTGAGAAGGAGCCAGG-3'）被用来在小鼠Ace2起始密码子下游13个碱基的位置引入以下序列：信号肽编码序列（翻译产生Ace2的WLLLSLVAVTTA氨基酸序列），与小鼠Ace2的前5个氨基酸相接，插入了SV40内含子以增强表达，872bp的人类ACE2 3' UTR，100bp的人类基因间序列位于Ace2polyadenylation区域的下游，包含一个反向排列的、由小鼠U6启动子驱动的Ace2-gRNA32指导RNA，带有2xPolIII终止子的元件，随后是Ace2、Splice接受器、SV40 polyadenylation序列，以及一个Flp重组酶靶点（FRT）位点，以及3个框架的ATG短开放阅读框。这个元件设计用来捕获并剪切任何可能从hACE2元件剪接过去的任何小鼠Ace2同源异构体。如果需要，FRT位点允许通过Flp介导的靶向串联整合事件的塌陷。(来源：J:101977)