这个靶向载体包含从5'到3'的强CAGG(CMV-IE增强子/鸡β-actin/兔β-球蛋白杂交)启动子,三对异种同源的lox位点(lox、lox2272和loxN),以及膜上的主要颜色标记(MEMbrane, PRIME)构建(详情如下),后面跟着FRT标记的neo抗性基因(neo)。整个构建通过电穿孔方式插入B6_ColA_RMCE胚胎干细胞的1号和2号外显子之间。通过Flp介导的重组,FRT标记的neo基因被去除。Rosa(PRIME)构建包含三对异种同源lox位点,它们间隔着四个荧光蛋白:核近红外荧光蛋白(3xNLS-iRFP670)、膜结合的红色荧光蛋白(M-mSc-I)、膜结合的 cyan 荧光蛋白(M-mTq2)和膜结合的黄色荧光蛋白(M-mVen)。iRFP670在所有细胞中持续表达。为确保每次只表达一个荧光蛋白,每个开放阅读框下游插入了SV40的polyadenylation信号。当Cre激活时,lox位点重组产生三种互斥的切割可能性,首先是CAG启动子后面表达的荧光蛋白。(来源:J:101977)
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count