使用了经过基因改造的KOMP靶向ES细胞克隆Th_C09,其中插入了Engrailed的剪接接受器(SA)后面跟着ire-s lacZ基因盒,它们被置于Th基因的第6外显子之后的内含子中。通过双重组酶驱动的 cassette exchange技术,将lacZ等位基因重新工程到了Th-2A-Flpo。构建的靶向载体包含了Th编码序列的7-13号外显子、自启动肽P2A、Flpo、WPRE序列、牛生长激素的polyadenylation信号(bGH pA)以及由rox位点包裹的 puromycin筛选 cassette。这个靶向载体与pDIRE质粒一起,通过电穿孔法导入KOMP ES细胞,并通过 puromycin抗性选择。成功整合到Th位点并经历了RMCE的ES细胞克隆被用来培育杂交小鼠。随后,通过与CAG-Dre转基因小鼠(J:266806)杂交, puromycin筛选 cassette被去除了。

Basic Information

Allele
Strain of Origin
Allele Type
Mutation
Inheritance
Related Gene
Related Disease
Reference
C57BL/6N-Atm1Brd
Targeted
插入,基因内删除
--
1
2
11

Phenotypes

Legend:
hm: homozygous
ht: heterozygous
cn: conditional genotype
cx: complex: > 1 genome feature
tg: involves transgenes
ot: other: hemizygous, indeterminate,...
(F): Female
(M): Male
phenotype observed
N: normal phenotype
(#): related diseases count
Phenotypes:
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Phenotypes

References Literature

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