Igs7^{tm174(tetO-EGFP/RNAi:Hdac1,CAG-tdTomato,-tTA2)Tasic}

这个向量设计如下(从5'到3')：一个FRT3位点，两个鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件(用于在无转录激活因子时降低报告基因表达)，一个Tet响应元件/启动子(TRE2，详情后述)，一个-loxP-标记的终止子(包含所有三种阅读框的终止密码子，连接到人工的pA-hGHpA-PGKpA)，一个EGFP/RNAi:HDAC1融合蛋白(详述后)，一个木鼠肝炎病毒的后转录调控元件，一个BGHpolyA序列，两个鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件，一个CMV-IE增强子/鸡β-肌动蛋白/兔β-珠蛋白的混合启动子，一个-lox2272-标记的终止子(同样连接到人工的pA-hGHpA-TKpA)，一个tdTomato序列，一个病毒2A多肽，一个合成的修饰的四环素响应型转录激活器基因(tTA2(S))，一个WPRE，一个BGHpolyA，一个AttB位点，一个PGK-5'hygro插入片段，一个RNA剪接供体，一个FRT5位点，SA，3'hygro，SV40pA，以及AttP。使用的TRE2启动子是Tet响应的P>hCMV*-1<，它包含7个19bp的tet操作子序列(tetO)上游，紧邻一个简化的CMV启动子(P>min CMV<)，后者不包含完整的CMV启动子中的增强子。因此，没有tTA或rtTA与tetO结合时，P>hCMV*-1<是沉默的。EGFP/RNAi:HDAC1融合蛋白由合成的增强绿色荧光蛋白序列(EGFP)，一个约150bp连接序列，以及一个97bp的短发卡子RNA序列组成，目标是沉默小鼠Histone去乙酰化酶1位点(Hdac1)。(来源：J:101977)