CRISPR/cas9末端核酸酶用于针对3号染色体上位于SRY(性染色体决定区Y)盒2基因附近,大约100kb远的超增强子(SE)序列进行基因组编辑。此外,目标的是含Snrpn::tdTomato::WPRE::BHGpA::loxP-PGK-Puro-loxP序列的片段,这些序列包含了Snrpn的最小启动子、tdTomato荧光蛋白、WPRE序列、BGHpolyadenylation序列和一个含loxP标记的PGK-Puro选择子 cassette。通过接合PCR-SNP分析,我们确定了129染色体上插入了S2T序列(即Snrpn::tdTomato::WPRE::BHGpA)的ES细胞。随后,这些ES细胞被转染了表达Cre重组酶的质粒,以去除PGK-Puro序列(来源:J:282716)。
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cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count