Gt(ROSA)26Sor^{em1(tetO-flpo*/ERT2,CAG-GFP*)Nijo}

靶向载体被分为两个部分：调节模块和新抗原模块，两者由一个2x鸡γ球蛋白(CGG)绝缘子元件隔开。调节模块通过Cre重组后诱导表达诱导型flpo。新抗原模块包含表达GFP的肽抗原，它能被H2-Db限制的CD8 T细胞（GP-33-41）和H2-I-Ab限制的CD4 T细胞（GP67-77）识别，这些细胞在flp重组后识别GFP。载体从5'至3'包含：调节模块：loxP2-Puromycin抗性基因座-loxP1-位于flpo C端的人类ERT2（氨基酸251-596）顺向连接，间以pA，以及flpo/ERT2 N端的反向连接-loxP1-loxP2-tetO（pTRE紧密启动子）绝缘子（阻止pCAG增强子激活pTRE），新抗原模块：CAG启动子- GFP N端- FRT- FRT3-带有FLAG-TAG表位的新抗原- FRT- polyA- FRT3-剪接接受器-过早终止（替代阅读框）- C端GFP- polyA。新抗原由淋巴细胞性脑膜炎病毒(LCMV)糖蛋白序列改造而成，DNA序列被分割到三个外显子，其中第2外显子反转，并由不兼容的FRT座（F3和FRT） flank。 这个靶向载体被插入到Rosa26定位点。在有flpo存在的情况下，第2外显子反转，使拼接位点对齐，允许产生全长包含肽抗原的GFP转录。来源：J:317156