P2rx7^tm1.2Jde

这个靶向载体从5'到3'的序列是：一个loxP位点，接着是小鼠内皮1的3'端(1.4kb)，这部分被替换为人源P2RX7基因的cDNA，包括2-13号外显子；一段反向定向的筛选标记，由frt位点 flank，包含磷酸甘油酸激酶(PGK)驱动的诺卡因抗性基因，带有牛生长激素(bGH)的poly A信号(pA)，第二个loxP位点，以及一个由bGHpA、PGK pA和2个SV40 pA组成的四重poly A信号。通过在胚胎干细胞中通过同源重组传递修改后的等位基因，产生了雄性杂种后代。接着，这些后代与删除者-flp小鼠杂交以去除含FRT的neo cassette。得到的P2rx7基因突变型小鼠进一步与删除者-cre小鼠杂交，以移除人源P2RX7基因cDNA，从而产生无功能的突变基因。功能缺失的等位基因通过 Western blot 和功能试验(实验号J:244726)得到了确认。