这个向量从5'到3'设计如下:一个FRT3位点,两个鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件(用于减少在无转录激活剂时报告基因的表达),一个Tet响应元件/启动子(具体见下文),一个-loxP-标记的终止子(包含连接到合成pA-hGHpA-PGKpA的三种读框的终止密码子),一个合成增强绿色荧光蛋白序列(EGFP),一个木鼠肝病毒后转录调控元件(WPRE,以提高mRNA的稳定性),一个BGHpolyA,两个鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件,一个CMV-IE增强子/鸡β-肌动蛋白/兔β-珠蛋白融合启动子(CAG,来自pCAGGS),一个-rox-标记的终止子(同样连接到合成pA-hGHpA-TKpA的终止密码子),一个合成修改的四环素响应型转录激活器基因(tTA2S>),另一个WPRE,一个BGHpolyA,一个AttB位点,一个PGK-5'hygro插入片段,一个RNA剪接供体以及一个FRT5位点。使用的TRE2启动子是Tet响应的P>hCMV*-1<,它包含7个19bp的tet操作子序列(tetO)作为上游的最小CMV启动子(P>min CMV<),后者不包含完整的CMV启动子中的增强子。因此,没有tTA或rtTA与tetO结合时,P>hCMV*-1<是沉默的。通过ΦC31介导的重组,移除了AttB/AttP-配对序列,并替换为重组的AttB/AttP位点(AttL)。(来源:J:260362)
Basic Information
(129S6/SvEvTac x C57BL/6NCrl)F1
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count