使用同源重组(借助靶向CRISPR/cas9内切酶活性),通过同源重组技术,创建了一个双顺反子的Ins1-2A-Cre敲入等位基因。这个基因中插入了病毒2A短肽序列(T2A,促进核糖体跳过)和Cre重组酶基因,位于Ins1的内源性终止密码子上游。Ins1-CRISPR-F和Ins1-CRISPR-R片段被插入到携带gRNA和Cas9表达组件的质粒的入位位点。这些DNA载体通过微注射方式注入C57BL/6J受精卵的核中。胚胎随后被移植到伪孕母体内。(来源:J:240225)
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count