Igs7^{tm143.1(tetO-RCaMP1.07)Hze}

替换载体设计如下：从5'至3'有FRT3位点、两个鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件、修改的 Tet响应元件/启动子、一个含floxed-STOP cassette的序列、R-CaMP1.07具体细节、WPRE、BGHpolyA、两个鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件、AttB位点、一个PGK-5'hygro cassette、RNA剪接供体以及FRT5位点。先前在TIGRE中通过FRT3::AttB::PGK-neoR-polyA::FRT5::splice acceptor::3'hygro cassette::SV40 polyA:AttP对胚胎干细胞进行靶向，现在通过转染pTRE-LSL-R-CaMP1.07替换载体和Flp重组酶载体，进行重组介导的 cassette 交换（RCME）。通过Phic31介导的重组，移除了AttB/AttP引导的序列（PGK-Neo-polyA::frt5::RNA splice acceptor::3'hygro-polyA），并替换为重组的AttB/AttP位点（AttL）。R-CaMP1.07是一种检测细胞钙浓度的红色钙感应分子，是R-CaMP1.01的改良版本，通过R-GECO1随机突变插入构建。它由35aa的polyHis质粒前导序列、13aa的鸡平滑肌肌动蛋白轻链激酶、环转的红色荧光蛋白（mApple，146-231序列后跟1-145）、大鼠钙调素DNA片段、15aa连接器以及一个自切割肽（F2A）组成。（来源：J:241918）