Tg(RP23-370F21-RCaMP1.07)B3-3Mik

这个C57BL/6J小鼠的BAC（Bacterial Artificial Chromosome）RP23-370F21包含了Acta2基因的全长（actin alpha 2基因），以及大约92kb的5'上游序列（包括fas基因簇）和68kb的3'下游序列（包括stambpl1基因簇）。通过插入RCaMP1.07-pA构建，这个RCaMP1.07是一个带有SV40polyadenylation信号和周边序列的基因编码钙指示器，它被插入到了BAC Acta2基因的起始密码子ATG位置（替换掉了Acta2在exon2的起始密码子）。BAC上的其他区域没有被改动。RCaMP1.07是一种红色的钙感应分子，能检测细胞内的钙浓度，是R-GECO1的改良版本，通过随机突变改造。它由一个热稳定性的35aa polyHis序列（RSET）、一个针对钙结合的CaM的鸡平滑肌肌动蛋白轻链激酶的13aa肽（M13）、环转的红色荧光蛋白mApple（146-231和1-145氨基酸序列，下面有描述的突变）、一段鼠钙调素DNA片段（CaM，2-148aa）、15aa连接肽以及一个自切割肽F2A组成。与R-GECO1相比，mApple的K47V和T49V突变增加了对钙的依赖性荧光变化，C端的F2A增加了钙依赖性荧光增强，并能将RCaMP1.07从细胞核中排出。（来源：J:314125）