Tg(Cck-EGFP/RNAi:Gad1)2Mirn

这个转基因构建使用了来自BAC RP23-60I1的116kb片段，它包含了胆囊收缩素（Cck）基因座，以及大约55kb的centromeric序列（包括Trak1基因的部分区域）和56kb的telomeric序列。周边序列中没有确认的完整基因。通过同源重组/巴氏重组技术，将eGFP、一个lox2272位点、一段人类β-珠蛋白的迷你基因（包含exon1-intron-exon2，其中intron内插入了miRNA:Gad1序列）、第二个lox2272位点和一个SV40的polyA信号插入到了BAC编码的Cck起始密码子内。此外，还存在一个FRT标记的诺卡因抗性基因，但在体外的巴氏重组过程中被移除了。miRNA:Gad1序列是融合的miR30和miR:Gad1合成miRNA，针对小鼠谷氨酸脱羧酶1（Gad1或GAD67）的mRNA（mp ID 283874），周围有独特的miR-30序列。BAC的其他区域没有被改动。（来源：J:227900）