这个靶向载体从5'至3'的序列包含:一段从内含子2到内含子3的不完整 intron 2 和 intron 3 区段,其中含有一个FRT3位点在内含子3,一段到终止密码子的内源性exon 4部分序列,一个与编码序列同框的内源性核糖体进入位点2(IRES2),一个与编码序列同位的dgCre融合基因,一段牛生长激素的polyA信号,一个AttB位点,一个PGK-Neo-polyA插件,一个FRT5位点,一个mRNA剪接接受器,hygromycin基因的3'端加上SV40的polyA信号,以及一个AttP位点。dgCre融合基因是一个增强绿色荧光蛋白/Cre重组酶融合基因,其N端连接了来自大肠杆菌K-12野生型染色体中具有G67S突变的二氢叶酸还原酶(DHFR或folA)的前159个氨基酸,并进行了R12Y/Y100I的不稳定区域修饰。通过ΦC31整合酶介导的重组移除了AttB/AttP引导的序列。尽管设计成对三甲基磺酸甲酰胺(trimethoprim)诱导,捐赠者报告在诱导前后Cre的表达和活性模式没有变化。无论是否诱导,未检测到EGFP。(来源:J:227758)
Basic Information
(129S6/SvEvTac x C57BL/6NCrl)F1
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count