Vcam1^tm2Dmil

使用顺序标签和交换基因靶向技术，对转录启动子的5'NF-B结合位点插入了6个核苷酸突变，Vcam1的5'UTR第1外显子中则有3个碱基突变。首先的"标签"靶向载体替换掉了编码信号肽的第1外显子和部分编码Ig样域1的第2外显子，用pgk-neomycin/TK的 cassette。这个Tag构建在胚胎干细胞中转染，然后筛选出单一的正确靶向克隆，再用第二个"交换"靶向载体替换neo cassette，导致转录起始点5'端的6个核苷酸替换，破坏了5'NFKB1（NF-κB）结合位点区域，并在5'UTR第1外显子的下游3个碱基位置引入突变。通过 Western blot 分析，证实了心内皮细胞中存在突变蛋白。(文献来源：J:227109)