Tg(RP23-370F21-GCaMP2)6Mik

C57BL/6J小鼠的BAC RP23-370F21含有Acta2基因的全长(约184kb)以及5'端约92kb的序列(包括Fas基因簇)和3'端约68kb的序列(包括Stambpl1基因簇)。通过同源重组/巴氏重组技术，将GCaMP2-pA构建插入BAC Acta2基因的起始密码子位点(替换Exon 2的起始密码子)，但BAC上其他区域未受影响。来自创始系6的实验鼠在平滑肌肌动蛋白(包括血管)中表现出高感应表达(即GCaMP2表达与EGFP荧光)，基因表达模式与内源Acta2一致。GCaMP2是一种钙感应分子，由一个热稳定性的35aa polyHis引导序列(RSET)、13aa的鸡平滑肌肌动蛋白轻链激酶(M13)肽、环转EGFP(149-238和1-144氨基酸序列，下有变异)以及一段大鼠钙调素DNA片段(CaM，2-148aa)组成。cpEGFP的变异导致亮度增强(180Y和V93I)、热稳定性和防止GFP二聚体形成(206K)。来源：(J:314125)