Fezf1^{tm1.1(cre/folA)Hze}

之前通过T2A-Cre载体在Fez家族锌指1翻译终止密码子下游定向编辑的ES细胞，随后通过"T2A-hDHFR/Cre"载体和FLP表达质粒进行再定向，以促进重组。成功再定向的ES细胞从5'至3'序列包含有部分Fezf1内含子3序列，含frt3位点，部分Exon4序列至（但不包括）内源性终止密码子，T2A切割序列与Fezf1编码序列同框，一个与Fezf1编码序列同框的dCre融合基因（下文详述），牛生长激素polyA序列，AttB序列，以及一个带有mRNA调料捐赠者-frt5和接受者在hygromycin基因中的PGK-hygromycin-SV40polyA插件箱。dCre融合基因，也称为去稳化Cre（DHFR/Cre或ecDHFR/Cre），是连接在E. coli K-12菌株染色体的二氢叶酸还原酶（DHFR或folA）N端，该基因带有G67S突变，并经过R12Y/Y100I的去稳化域修饰。通过ΦC31介导的重组，移除了AttB/AttP引导的序列，替换为重组的AttB/AttP位点（AttL）。（来源：J:146821）