Tg(Tagln-PLA2G2A*G29S)AMrj

这个7.2千碱基的转基因构建包含了小鼠转gelin基因(Tgln，也称为Sm22a)的启动子区域，从-2126到+4136bp，包括2126bp的5'上游序列，第一个外显子、第一个内含子以及第二个内含子的前11bp，接着连接了一个编码G29S突变的人类磷脂酶A2，IIA亚型（主要存在于血小板和关节液中的PLA2G2A），带有C端的V5标签和6个histidine（6xHis）序列的cDNA。蛋白质中第29位的甘氨酸，位于钙结合环，对于钙离子的结合至关重要，替换为丝氨酸导致酶失去催化活性。根据Southern blot分析，转基因A品系估计携带有超过50个拷贝的转录本。通过对转基因小鼠肝脏、肺、骨骼肌、心脏和主动脉进行RT-PCR分析以检测转录生成的PLA2G2A mRNA，以及 Western blot分析来检测蛋白质，结果显示该蛋白在富含平滑肌的组织中特异性表达，如主动脉、心脏和肺（文献J:34770, J:82809, J:209787）。