Igs7^{tm90.1(tetO-COP4*/EGFP)Hze}

这个靶向载体的设计如下：从5'至3'，包含FRT3位点、两个鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件的串联拷贝（用于在无转录激活蛋白时降低报告基因表达）、修改过的tet响应元件（TRE或tetO）、一个loxP引导的终止子（包含所有三种读框的终止密码子，连接到人工的pA-hGHpA-PGKpA序列），COP4*/EGFP编码序列、WPRE序列（以增强mRNA的稳定性）、牛生长激素的polyA信号、两个串联的鸡β-珠蛋白HS4绝缘子元件、一个AttB位点、一个PGK-5'的Hygro插入片段、RNA剪接供体以及FRT5位点。COP4*/EGFP融合蛋白是通过将来自Stigeoclonium helveticum的哺乳动物优化的通道光受体ShChR（Chronos）通过18个核苷酸的链接，与增强绿色荧光蛋白（EGFP）的N端相连形成的。Chronos是一种驱动于蓝绿光（470-530nm）的离子通道，能去极化细胞并引发动作电位，它对光敏感且反应速度较快。Chronos比之前的通道光受体有更高的灵敏度和更快的动态。之前在相同位置用FRT3-AttB-PGK-neoR-polyA::FRT5::splice acceptor::3' hygro cassette::SV40 polyA: AttP标记的胚胎干细胞被重新转染了这个靶向载体和Flp重组载体。通过与Gt(ROSA)26Sortm3(phiC31*)Sor小鼠杂交，去除了AttB/AttP-标记的PGK-Hygro-SV40pA片段，并用重组的AttB/AttP位点（AttL）替换，产生了Ai90D等位基因，其基因型为TIGRE-frt3-Ins-TRE-LSL-Chronos/EGFP-WPRE-bGHpA-Ins-AttL（参考文献：J:101977, J:219930）。