这个转基因包含了一个人类的BAC(细菌人工染色体,RP11-840.I14),通过插入人类HPRT的互补序列(包括1号外显子、1号内含子、2号外显子和部分2号内含子),一个鼠源的3' Hprt同源臂,一个I-Sce的线性切割位点,以及一个鼠源的5' Hprt同源臂。所有这些元件都被插入到BAC载体的sacB基因中。接下来,iCre/ERT2融合基因、一个内含子、SV40的早期polyA信号和一个48bp的Frt(Ffrt)位点标记的kanamycin抗性(Kan) cassette被直接插入到人类NOV基因的起始密码子(ATG)位置。短暂的转染使用FLP重组酶质粒去除了Kan cassette,然后修改后的BAC作为单一拷贝的“敲入”被用来靶向Hprt基因座的上游区域(J:204202)。
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count