先前通过T2A-Cre载体在parvalbumin翻译终止密码子下游靶向的ES细胞,随后用"T2A-hDHFR/Cre"载体和表达FLP的质粒进行再定向,以促进重组。正确重定向的ES细胞从5'至3'序列包含有frt3位点的Pvalb内含子3部分,Pvalb外显子4的片段(但不包括终止密码子),T2A与Pvalb编码序列同框,dCre融合基因与Pvalb编码序列同框,Pvalb3' UTR序列来自exon 4,AttB位点,以及一个PGK-hygromycin-SV40polyA插件(hygromycin基因中的mRNA调料供体-frt5位点-mRNA调料接受者)。dCre融合基因(不稳定Cre,hDHFR/Cre或ecDHFR/Cre)是连接在E.coli K-12菌株染色体的二氢叶酸还原酶(DHFR或folA)N端的Cre重组酶,带有G67S突变,并进行了R12Y/Y100I的不稳定区域修饰。正确重定向的ES细胞被注入受体囊胚。产生的嵌合动物与表达PhiC31的鼠杂交,以删除AttB/AttP引导的序列,并替换为重组的AttL位点。经trimethoprim诱导,Cre表达(通过ISH检测)在大脑皮层的散在细胞中以及脑干、中脑、延髓、苍白球和丘脑的特定群体中有效。(来源:J:199219, J:220523)

Basic Information

Allele
Strain of Origin
Allele Type
Mutation
Inheritance
Related Gene
Related Disease
Reference
(129S6/SvEvTac x C57BL/6NCrl)F1
Targeted
插入
--
1
--
1

Phenotypes

Legend:
hm: homozygous
ht: heterozygous
cn: conditional genotype
cx: complex: > 1 genome feature
tg: involves transgenes
ot: other: hemizygous, indeterminate,...
(F): Female
(M): Male
phenotype observed
N: normal phenotype
(#): related diseases count
Phenotypes:
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Phenotypes

References Literature

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