胚胎干细胞(ES), 之前通过T2A-Cre载体,位于parvalbumin翻译终止密码子下游被定向,随后转而使用T2A-CreERT2载体和表达FLP的质粒进行再定向。正确靶向的ES细胞具有从5'到3'的三个氨基酸连接序列,Pvalb内含子3中的frt3位点,部分Pvalb外显子4序列,直到但不包括内源性终止密码子,与Pvalb编码序列同框的T2A序列,CreERT2融合基因,Pvalb3' UTR序列来自exon 4,attB位点,一个PGK-hygromycin-SV40polyA插件,以及attP位点。这些正确定向的ES细胞被注入受体囊胚中。产生的嵌合动物与表达PhiC31的鼠杂交,以删除attB/attP保护的PGK插件。这些嵌合鼠随后与C57BL/6J纯种小鼠杂交至少两代(并移除PhiC31基因)。(来源:J:155793, J:191262, J:220523)
Basic Information
(129S6/SvEvTac x C57BL/6NCrl)F1
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count