CW/M 5这个CD4+ T细胞系来自C57BL/6小鼠,它们被注入了Blastomyces dermatitidis酵母细胞的细胞壁/膜成分。细胞表面的TCR Valpha链是Valpha2 Jalpha49,CDR3区域的氨基酸模式是AGGYQNFYFGKGSLTVIP,而Vbeta链是Vbeta1/D/Jbeta1.1,CDR3区域的模式是SQEGTGG。从克隆#5的基因组DNA中,我们扩增出了包含VJ区(从起始密码子上游7bp到Jalpha49编码区后71bp)的TCR-alpha基因片段,并将其插入pTalpha cassette。类似地,TCR-beta基因片段(包含从起始密码子上游16bp到Jbeta1.1编码区后17bp的VDJ区,也位于JC内含子),被克隆进pTbeta cassette。这些构建体随后被一起微注射到C57BL/6的卵母细胞中。链接PCR结果显示,1807号线的转基因成功地以TCRbeta-TCRalpha头对头和TCRalpha-TCRbeta尾对尾的方式整合到了染色体上(J:182207)。
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count