Igs3^{tm2.1(ACTB-EGFP*,-tdTomato)Luo}

pMADMalpha转基因是通过CMV增强子/鸡β-actin核心启动子（pCA）启动子、Frt位点、MADM GT cassette、第二个Frt位点、MADM TG cassette、第三个Frt位点以及SV40 T-抗原poly(A)信号构建的。MADM GT cassette包含一个突变增强绿色荧光蛋白（mut4EGFP的N端部分，从1-274号核苷酸）、β-珠蛋白内含子序列（含loxP标记的诺卡因抗性基因）以及带有三个Myc表位的ATG缺失的tdTomato序列（从3-1548号核苷酸，包括终止密码子）。MADM TG cassette则有ATG起始密码子、β-珠蛋白内含子序列和突变增强绿色荧光蛋白的C端部分（mut4EGFP的第二外显子，从275-735号核苷酸，包括终止密码子）。转基因通过电穿孔注入到129X1/SvJ x 129S1/Sv杂交F1产生的R1胚胎干细胞（ES细胞）中。ES细胞通过检测整合在靠近任何染色体端粒的基因间区的单拷贝转基因来筛选。这些细胞被鉴定为在10号染色体17.5-21.5Mbp区间，即Ahi1和Myb基因之间插入了完整单拷贝转基因，这个新插入位点被称为Miya10（或M10）。转基因还通过Cre介导的重组移除了neo cassette（来源：J:181830）。