在BAC RP24-95M11中,Cre编码序列被插入到了Phox2b基因的第2外显子中,这样产生了融合蛋白,它包含Phox2b的前82个氨基酸,与Cre重组酶相连。通过一步骤的重组修复,利用同源重组在第2外显子中引入了双重抗性基因簇,并通过筛选阳性克隆。接着进行第二轮重组,将抗性基因簇替换为含Cre和氨苄青霉素抗性基因簇。通过精确靶向,BAC克隆被进一步修改,去除了背景中的loxP和loxP511位点,以防止不必要的Cre重组。纯化的BAC被注入受精卵中,产生了具有详细分析的奠基系(J:180432)。
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count