Gt(ROSA)26Sor^{tm39(CAG-hop/EYFP)Hze}

Rosa-CAG-LSL-eNpHR3.0-EYFP-WPRE 定向载体设计如下：从 5' 至 3' 为 CMV-IE 增强子/鸡β-actin/兔β-球蛋白融合驱动子（CAG）、FRT 立即切割位点、一段 loxP 介导的停泊子（包含所有三种阅读框的终止密码子和三重polyA信号）、eNpHR3.0-EYFP融合基因、木瓜肝炎病毒的后转录调控元件（WPRE，以提高mRNA稳定性）、BGH polyA 启动子，以及attB/attP引导的PGK-FRT-Neo-polyA插入片段。初始的NpHR-EYFP融合蛋白通过将耐盐嗜盐细菌Natronomas pharaonis的halorhodopsin与增强黄色荧光蛋白（EYFP）同框连接而成。为了构建eNpHR3.0-EYFP融合蛋白，对NpHR-EYFP融合蛋白进行了改造，增加了钾通道Kir2.1基因的膜运输信号（KSRITSEGEYIPLDQIDINV）在NpHR和EYFP之间，以及在EYFP的C端添加了钾通道Kir2.1基因的内质网（ER）出口序列（FCYENEV）。这些改动旨在优化在哺乳动物系统中的表达，避免内质网聚集、促进膜转运，减少囊泡形成，并增强抑制作用。整个Rosa-CAG-LSL-eNpHR3.0-EYFP-WPRE定向载体被插入Gt(ROSA)26Sor基因座的exons 1和2之间。（文献引用：J:172634, J:182204）