Gt(ROSA)26Sor^{tm38.1(CAG-GCaMP3)Hze}

Rosa-CAG-LSL-GCaMP3-WPRE 定向载体设计如下：从 5' 至 3' 包含 CMV-IE 增强子/鸡β-actin/兔β-球蛋白杂交启动子（CAG）、FRT 立即剪切位点、一段所有读框都有终止子的 loxP 系列停泊子（包括三重 polyA 标记）、GCaMP3 结合基因、木鼠肝炎病毒的后转录调控元件（WPRE，以提高 mRNA 稳定性）、BGH polyA 标记，以及 attB/attP 系列的 PGK-FRT-Neo-polyA 插入片段。GCaMP3 结合基因编码鸡平滑肌肌动蛋白轻链激酶的 M13 片段 cDNA，以及一个环转录的 EGFP（氨基酸序列 149-238，后面跟着 1-144 包括 M153K、V163A、S175G、D180Y、T203V、A206K 和 V93I 的突变以增加动态范围和基线荧光），以及一段修改过的鼠钙调素的 2-148 位氨基酸序列（带有 N60D 点突变以增加对小钙信号的荧光变化响应）。通过 PhiC31介导的重组，Neo 选择子被移除。（来源：J:171735）