这种小鼠是通过一种增强子陷阱的 lentiviral 转基因方法产生的。转基因设计使用了自我同源失活的 lentiviral 系统(FUGW),结合了人类神经素最小启动子(-244 至 +47)、β-珠蛋白内含子、icre/ERT2融合(经过哺乳动物密码子优化,无潜在隐蔽剪接位点,改变终止密码子以降低哺乳动物的表观遗传沉默风险,并减少 CpG 序列以减少哺乳动物中的基因沉默可能性),接着是突变的人类雌激素受体配体结合域(ERT2),以及木鼠肝炎病毒的后转录调控元件(WPRE,以提高 mRNA 的稳定)。这些包装好的 lentivirus 通过下丘脑( zona pellucida 下)注射到 C57BL/6J 小鼠的1-2细胞阶段胚胎中。最初的杂交后代与 C57BL/6 猪杂交,然后与 B6-Gt(ROSA)26Sortm1Sor 小鼠杂交来评估 Cre 活性和遗传。筛选出 Cre 阳性但 lacZ 阴性的个体,再与 C57BL/6 小鼠杂交,最终建立了 14163 系列。(来源:J:150856)
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count