L1L2_Bact_P cassette被插入到染色体3的90,255,407位置,位于关键的exons 2和3上游。该 cassette 包含FRT位点、lacZ序列和一个loxP位点,随后是由人类β-actin启动子驱动的neomycin抗性基因、SV40polyA以及第二个FRT位点和第二个loxP位点。第三个loxP位点位于exon 3下游,位置为90,257,058。因此,exons 2和3被loxP位点所环绕。在携带这种等位基因的 mice中通过flp重组酶表达,可以创建一个"条件准备好"(floxed)基因型。随后的cre表达会导致敲除小鼠。如果没有flp表达而有cre,会造就一个报告基因敲除小鼠。更多关于这种IKMC等位基因以及其它靶向策略的信息,可参考http://www.informatics.jax.org/mgihome/nomen/IKMC_schematics.shtml。RT-qPCR结果显示,杂合子表达的mRNA相对野生型控制组约50%。E18脑组织的 Western blot分析显示,杂合子的蛋白质含量约为50%,而纯合子则无蛋白质表达。E16.5胚胎前脑切片的免疫染色确认了在杂合子和纯合子胚胎大脑皮层细胞核中,表达量均有所减少且缺失。(文献引用:J:157065, J:344365)
Legend:
cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count