Chat/Slc18a3^tm1.1Vpra

在Slc18a3(Chat基因的第一个内含子内，靠近起始密码子的位置)的译码起始密码子上游添加了一个LoxP序列，大约260bp，然后在终止密码子下游大约1.5kb的位置又添加了第二个LoxP。这个边界区域包含了Chat基因的第二个外显子。随后，TK-Neo cassette紧接在第二个LoxP之后，紧接着是一个第三个LoxP，所有这些都在同一方向上。通过体内Cre介导的重组，这个含TK-Neo cassette的敲除区域从鼠的脑中被剔除。用qPCR检测，没有在纯合小鼠大脑中检测到Slc18a3 mRNA。在脊髓提取物的Western blot分析和神经肌肉接头的免疫染色中，纯合突变小鼠也没有检测到Slc18a3蛋白。E18.5期脊髓中Chat蛋白水平升高，而E18.5期鼠脑的qPCR结果显示Chat mRNA水平上升。(来源：J:153908)