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构建了一个靶向载体，用于在基因座上进行点突变。通过PCR定点突变技术，插入了P394L变异（一个C到T的转换），位于第8外显子。这个变异等同于人类基因中的P392L替换。紧接着在第7外显子下游插入了含loxP标签的neo cassette。定向靶向后，短暂的Cre重组酶表达去除了neo cassette，留下一个loxP位点。Southern blot和基因组PCR分析证实了构建的正确插入（J:141179）。