使用了含有Tcrbtm3Slek突变的ES细胞,这些细胞的Dbeta2-Jbeta2簇在两个拷贝上都缺失,且一个Dbeta1基因片段有缺失。接下来,Vbeta14基因段的上游重组信号序列(RSS)被Dbeta1基因的上游RSS替换。用于定向的neo抗性基因座的敲除通过Cre重组酶的暂时表达得以消除,留下一个位于敲入RSS上游172bp的单个LoxP位点。仅选择那些转录突变与Dbeta1基因片段共存的克隆。由于Dbeta1的突变阻碍了Vbeta14基因段的重组,这些干细胞衍生出的鼠将功能上表现为Vbeta14基因段的单拷贝缺失。通过Southern blot确认了目标修饰的发生,通过Rag2缺陷的同种异体细胞补全技术产生了转基因小鼠(J:132446)。
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cx: complex: > 1 genome feature ot: other: hemizygous, indeterminate,... (F): Female
(M): Male
N: normal phenotype
(#): related diseases count