一种影响 RYR1 基因剪接的新型纯合内含子变异导致胎儿水肿

一、研究背景与目的

胎儿水肿是罕见且严重的胎儿发育异常，表现为全身水肿及多器官功能异常。RYR1 基因编码骨骼肌中的 ryanodine 受体，在肌浆网中作为钙释放通道，同时也用于连接肌浆网和横小管。其突变与恶性高热、中央核心病等相关，也可能关联胎儿水肿。本研究针对一个有 3 例胎儿水肿病史的家系，探究是否存在新的致病机制。

二、研究方法

• 研究对象：纳入一对健康非近亲夫妇及其 6 次妊娠后代（2例活产、1例流产、3例水肿胎儿）。
• 基因检测：对水肿胎儿脐带和父母外周血行全外显子测序，发现 RYR1 基因 c.538-33C>A 突变。
• 功能分析：利用RDDC（罕见病数据中心）工具及其他类似工具如HSF、SpliceAI等预测突变对剪接的影响，并通过体外 minigene 剪接实验和体内逆转录 PCR 验证。

三、研究结果

• 突变鉴定：在 RYR1 基因第 6 内含子发现新的深内含子变异 c.538-33C>A，家系中水肿胎儿为杂合子，父母同为杂合子，活产子女中 1 例野生型、1 例杂合子。根据 ACMG（美国医学遗传学和基因组学学院）指南，RYR1 基因中的 c.538-33C>A 突变被归类为意义不确定的变异。RDDCRNA 分析显示，该突变可能与野生型剪切模式一致，或导致内含子滞后或外显子跳跃等效应。
• 剪接影响：体外实验：突变导致两种异常剪接 —— 外显子 7 完全缺失或内含子 6 保留 31bp，均产生截短蛋白，与RDDC预测结果吻合。体内实验：父母携带突变时出现正常与异常剪接混合，异常剪接导致阅读框移位和过早终止密码子，形成截短蛋白。

四、研究结论

本研究首次报道 RYR1 基因 c.538-33C>A 杂合突变通过影响 mRNA 剪接引发胎儿水肿，为该病提供了新致病机制。但胎儿水肿机制可能涉及多因素，需进一步研究验证以完善诊疗方案。

RDDC网站上的AI工具在每次预测时均会进行全新计算，因此不同次的预测结果并非固定不变。